IL-12小鼠白細胞介素12ELISA試劑盒技術指導

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠白細胞介素12（IL-12）的含量。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠白細胞介素12（IL-12）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細胞介素12（IL-12）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

二、“IL-12小鼠白細胞介素12ELISA試劑盒技術指導”標本要求

    在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行檢測的樣本，及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃備用，有條件的，-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。

1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

三、我公司“”*優勢：

1.嚴格的質控體系：所有試劑盒從原料到成品經過嚴格的質控，確保試劑盒質量及穩定性；

2.產品經過不斷優化，具有很好的靈敏度；

3.綜合指標特性，研發便捷操作的試劑盒；

4.*分裝：專業的，可靠的實驗結果，優秀的產品質量，低廉的市場價格，實惠、經濟、可靠。

四、樣品收集、處理及保存方法

(1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

(2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

(3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

(4）組織勻漿-----將組織加入適量shengli鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

(5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

五、檢測前準備工作:

1. 請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶，屬于正常現象，可用40℃水浴微加熱使結晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。

3.  標準品: 加入標準品&標本稀釋液1.0ml至凍干標準品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據需要進行倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

4. 生物素化抗體工作液：實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計)，實際配制時應多配制100-200μl。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。

5. 酶結合物工作液：實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計)，實際配制時應多配制  100-200μl。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。

六、操作注意事項

(1）試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

(2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

(3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

(4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

(5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

(6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

(7）底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

(8）加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

(9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

七、客戶評論

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八、產品訂購說明：

1.絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。

2.部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。

3.部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日價格為準。

4.請辦理完后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、信息、等形式通知我們。

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